MikroRNR, kurios stabilizuoja p53 žmogaus papilomos viruso teigiamose vėžio ląstelėse, identifikavimas

Journal of Virology cover image

SANTRAUKA

Etiologiškai 5 % visų vėžio atvejų visame pasaulyje sukelia didelės rizikos žmogaus papilomos virusai (hrŽPV). Šie virusai koduoja du onkoproteinus (E6 ir E7), kurių ekspresija reikalinga vėžio atsiradimui ir palaikymui. Tarp jų ląstelių taikinių yra p53 ir retinoblastomos naviko slopinimo baltymai. Dėl hrHPV E6 sukelto p53 ubikvitinimo slopinimo per E6AP ubikvitino ligazę p53 stabilizuojamas, o tai sukelia ląstelių apoptozę. Mes panaudojome gyvų ląstelių didelio našumo ekraną, kad nustatytume, ar egzogeninė mikroRNR (miRNR) transfekcija turėjo galimybę stabilizuoti p53 hrHPV teigiamose gimdos kaklelio vėžio ląstelėse, ekspresuojančiose p53 fluorescencinį baltymą. in vivo p53 stabilumo reporteris. Tarp miRNR, kurių transfekcija lėmė didžiausią p53 stabilizavimą, buvo 375-3p, kuris anksčiau buvo pranešta, kad stabilizuoja p53 HeLa ląstelėse, užtikrindamas ekrano patvirtinimą. 32 geriausios miRNR, be 375-3p, buvo toliau vertinamos naudojant antrą ląstelėje pagrįstą p53 stabilumo reporterių sistemą, taip pat nereportuojančiose HeLa ląstelėse, siekiant ištirti jų poveikį endogeninio p53 baltymo lygiui, todėl buvo identifikuotos 23 miRNR. kurių transfekcija padidino p53 lygį HeLa ląstelėse. Nors kelios miRNR, kurios stabilizavo p53, sumažino E6AP baltymų kiekį, visos buvo nukreiptos į ŽPV onkoproteino ekspresiją. Toliau ištyrėme šių miRNR pogrupius, kad jie galėtų sukelti apoptozę, ir nustatėme, ar tai buvo tarpininkaujama p53. Konkrečių miRNR įvedimas atskleidė stebėtinai nevienalyčius atsakus įvairiose ląstelių linijose. Nepaisant to, kai kurios čia aprašytos miRNR gali būti gydomos ŽPV teigiamų vėžio formų gydymui.

SVARBU Žmogaus papilomos virusai sukelia maždaug 5% visų vėžio atvejų visame pasaulyje ir koduoja genus, kurie prisideda prie šių vėžio formų atsiradimo ir palaikymo. Virusinis onkoproteinas E6 yra ekspresuojamas visuose ŽPV teigiamuose vėžiuose ir veikia, nukreipdamas p53 skaidymą per ląstelių ubikvitino ligazę E6AP. P53 skilimo slopinimas sukelia ŽPV teigiamų vėžio ląstelių apoptozę. Naudodami didelio našumo gyvų ląstelių tyrimą, nustatėme keletą miRNR, kurių transfekcija stabilizuoja p53 ŽPV teigiamose ląstelėse. Šios miRNR gali būti naudojamos gydant ŽPV teigiamą vėžį.

.

Leave a Comment

Your email address will not be published.